結(jié)直腸癌

gp96激活患者免疫系統(tǒng)在結(jié)直腸癌自身肝轉(zhuǎn)移患者的腫瘤中提取的HSPPC-gp96(Oncophage)疫苗接種于手術(shù)治療后的患者，誘導腫瘤特異性T細胞應(yīng)答。在29例患者中，手術(shù)2年后患者總生存率和無病生存率分別為79%和32% (圖1)。有15例(52%)觀察到先前存在的I類HLA限制性T細胞介導的抗結(jié)腸癌反應(yīng)發(fā)生了顯著的增加且未觀察到相關(guān)毒性。與無應(yīng)答的受試者相比，有免疫應(yīng)答的患者2年總生存和無病生存期顯著改善，獨立于其他臨床預(yù)后因素，具有統(tǒng)計學上顯著的臨床優(yōu)勢(2年總生存為100%vs50%，P=0.001，圖2A；無病生存期為51%vs8%，P=0.0001，圖2B)。疫苗能顯著促進CD8+ T細胞對結(jié)腸癌的應(yīng)答，使患者可以更好的無瘤生存[1]。

圖1 29例肝轉(zhuǎn)移的直腸癌患者術(shù)后接受gp96自體免疫治療的生存率。總生存率和無病生存率分別為79%和32%。中位隨訪為24個月。

圖2 肝轉(zhuǎn)移的直腸癌患者術(shù)后接受gp96自體免疫治療后有免疫反應(yīng)和無免疫反應(yīng)的不同臨床結(jié)果。

還有研究發(fā)現(xiàn)，使用從黑色素瘤和結(jié)直腸癌患者的自體腫瘤組織中純化的熱休克蛋白gp96進行疫苗接種，大約50%接種疫苗的患者可以產(chǎn)生或增強黑色素瘤特異性T細胞應(yīng)答，在經(jīng)手術(shù)治愈的大腸癌肝轉(zhuǎn)移患者中也得到了類似的結(jié)果，表明該疫苗誘導的T細胞免疫應(yīng)答與黑色素瘤(腫瘤應(yīng)答)和結(jié)直腸癌患者(無病和5年總生存期)的臨床應(yīng)答之間存在明確的關(guān)聯(lián)[2]。

接種自體腫瘤HSPPC-96疫苗后患者體內(nèi)抗腫瘤T細胞和NK細胞增加。

熱休克蛋白除參與適應(yīng)性免疫系統(tǒng)的激活外，對結(jié)直腸癌患者接種自體腫瘤提取的GP96，在NK敏感靶標存在的情況下，使自然殺傷細胞活性顯著增強。此外，即使在沒有單核細胞的情況下，CD56+淋巴細胞在體外接觸GP96時也會發(fā)生功能和表型激活，這支持了GP96對這些細胞亞群的潛在直接活性[3]。

黑色素瘤

在入選的36例患者中，72%為IV期黑色素瘤，83%之前接受過全身治療。自體腫瘤來源的熱休克蛋白肽復(fù)合物96 (HSPPC-96)以三種劑量水平之一制備(2.5、25或100 μg/劑量)，全部36例患者均接受了治療，沒有發(fā)現(xiàn)嚴重的毒性反應(yīng)。11名IV期??素瘤的患者的?進展?存率和總?存率分別為45%和82%，中位隨訪時間為10年。自體腫瘤源性HSPPC-96在所有試驗劑量下都是可行和安全的，觀察到的免疫效果和抗腫瘤活性適中，排除了生物活性劑量的選擇[4]。

11名IV期??素瘤的患者的?進展?存率和總?存率分別為45%和82%，中位隨訪時間為10年。

第二項研究也確認了自體的、腫瘤來源的熱休克蛋白gp96肽復(fù)合物的抗腫瘤活性。患者(N=322)被隨機分配為2:1，接受含有達卡巴嗪、替莫唑胺、白細胞介素-2或gp96肽復(fù)合物治療。這項開放標簽試驗在全球71個中心進行，對患者的安全性和總生存率進行監(jiān)測。結(jié)果表明gp96肽復(fù)合物對患者無明顯毒性。結(jié)果顯示，兩組的總生存率在統(tǒng)計學上無顯著差異，接受gp96肽復(fù)合物免疫的M1a和M1b亞期患者比接受較少此類治療的患者存活時間更長，但在M1c分期患者中未檢測到這種差異[5]。

胰腺癌 

一項I期臨床試驗，確定從完全切除的胰腺腫瘤中純化自體疫苗HSPPC-96 (gp96, Oncophage)的可行性，并探討治療患者的免疫反應(yīng)和臨床結(jié)果。受試者每周接種4次5μg自體HSPPC96疫苗，除此之外，受試者既未接受輔助化療，也未接受放療。10名患者接受了完整療程的疫苗接種后，未遇到劑量限制毒性且中位總生存期為2.2年(標準治療藥物吉西他濱單藥治療的中位生存期是6個月，顯著延長４倍)。10名接受治療的患者中有3人在2.6年、2.7年和5.0年隨訪時無病生存[6]。

惰性非霍奇金淋巴瘤

這項研究仍在進行中，迄今已有20名患者參加了這項Ⅱ期臨床試驗，這些患者的中位年齡為58歲(范圍45-83歲)，成功制備了17例不同惰性組織(濾泡型，n = 9;小淋巴細胞，n = 6;邊緣區(qū)，n = 2)，提示可從大多數(shù)惰性淋巴瘤患者中制備HSPPC-96，而不考慮其組織學亞型。患者接受了中位數(shù)4次疫苗接種(范圍1-14劑)。患者接受了中位數(shù)4次疫苗接種(范圍1-14劑)，耐受性非常好，幾乎沒有觀察到不良影響。在可評估的患者中，濾泡性淋巴瘤、小淋巴細胞性淋巴瘤和邊緣區(qū)淋巴瘤的療效持續(xù)時間分別為8、12和13個月。數(shù)據(jù)初步表明，這種新型疫苗制劑在惰性淋巴瘤患者中的臨床治療是有效的[7]。

膠質(zhì)母細胞瘤 

復(fù)發(fā)性多形性膠質(zhì)母細胞瘤(GBM)患者預(yù)后較差，可通過免疫治療改善。在一項開放標簽、單臂、Ⅱ期研究中，可手術(shù)切除的復(fù)發(fā)性GBM成人患者在全切除后接種自體熱休克蛋白肽復(fù)合物-96 (HSPPC-96)疫苗，主要終點是6個月的總生存期；次要終點包括總生存期、無進展生存期、安全性和免疫分析。在意向治療人群和療效人群中進行結(jié)果分析發(fā)現(xiàn)，在2007年10月3日至2011年10月24日期間，41例患者接受了復(fù)發(fā)性GBM的全切除，并接受了中位數(shù)的6劑HSPPC-96疫苗。治療后，90.2%的患者6個月存活(95%置信區(qū)間[CI]: 75.9-96.8)， 29.3%的患者12個月存活(95% Cl: 16.6-45.7)，中位總生存期為42.6周(95% Cl: 34.7-50.5)。27例(66%)患者在治療前淋巴細胞減少，淋巴細胞計數(shù)低于隊列中位數(shù)的患者顯示總生存期降低(風險比:4.0;95% Cl: 1.4-11.8;P=0.012)，無治療相關(guān)死亡病例。報告了37例嚴重(3-5級)不良事件，其中只有1例與疫苗相關(guān)的3級機體不良事件。結(jié)論：HSPPC-96疫苗治療復(fù)發(fā)性GBM是安全的，值得進一步研究[8]。

另一項研究表明，多形性膠質(zhì)母細胞瘤(GBM)腦組織中與gp96結(jié)合的多肽可用于復(fù)發(fā)性GBM患者的安全免疫。對12例復(fù)發(fā)性GBM患者在接受手術(shù)切除腫瘤提取的自體HSPPC96疫苗免疫前和免疫后進行多模式免疫監(jiān)測。臨床終點包括安全性評估和總生存率。結(jié)果顯示:未發(fā)現(xiàn)與疫苗相關(guān)的不良事件。對接種疫苗前后外周血白細胞的檢測顯示，在12名接受治療的患者中，有11人出現(xiàn)了針對與gp96結(jié)合的多肽的顯著外周免疫反應(yīng)。接種疫苗后免疫應(yīng)答者的腦組織活檢顯示局灶性CD4+、CD8+、CD56+和IFNγ+細胞浸潤，與腫瘤部位特異性免疫應(yīng)答一致。免疫應(yīng)答者在手術(shù)和接種疫苗后的中位生存期為47周，而單個無應(yīng)答者的中位生存期為16周。結(jié)論：這些數(shù)據(jù)表明個體患者對自體腫瘤源性多肽結(jié)合gp96產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)[9]。

在一項開放標簽、單臂、I期研究中，成人患者在手術(shù)切除后新診斷的GBM患者聯(lián)合使用標準治療方法接種HSPPC-96疫苗。主要終點為不良事件發(fā)生頻率和6個月無進展生存期(PFS)。次要終點包括總生存率(OS)、PFS和腫瘤特異性免疫反應(yīng)(TSIR)。2013年9月至2015年2月共入組20例新診斷的GBM患者。未發(fā)現(xiàn)3級或4級疫苗相關(guān)不良事件。中位隨訪時間為42.3個月，6個月時PFS為89.5% (95% CI, 66.9%-98.7%)，中位PFS為11.0個月(95% CI, 8.2-13.8)，中位OS為31.4個月(95% CI, 14.9-47.9)。接種疫苗后TSIR顯著增加2.3倍(95% CI, 1.7-3.2)。接種后TSIR高的患者的中位OS為>40.5個月(95% Cl，不可計算)，而接種后TSIR低的患者的中位OS為14.6個月(95% CI, 7.0-22.2)(危險比，0.25;95%置信區(qū)間,0.071-0.90;P = 0.034)。多變量Cox回歸模型顯示疫苗接種后TSIR是生存的主要獨立凹陷預(yù)測因子。結(jié)論：HSPPC-96疫苗與標準療法相結(jié)合，是治療新診斷的GBM患者的一種安全有效的策略。疫苗接種后TSIR是預(yù)測疫苗療效的良好指標[10]。

腎癌

局限性腎細胞癌的治療包括部分切除或根治性切除，有研究前瞻性地檢查了腎切除術(shù)后接受熱休克蛋白肽復(fù)合物96 (HSPPC-96)疫苗治療的轉(zhuǎn)移性腎細胞癌患者的生活質(zhì)量(QOL)，對36例初診期腎細胞癌患者、治療3周后治療結(jié)束日及隨訪1個月時的生活質(zhì)量和侵入思想進行測定。在每次評估中，患者完成RAND 36項健康調(diào)查和事件影響量表(IES)。混合模型分析顯示，隨著時間的推移，物理成分總結(jié)分數(shù)有顯著提高(p<0.0001)。結(jié)論：HSPPC-96疫苗治療期間，患者生活質(zhì)量保持穩(wěn)定或改善[11]。

另一項研究評估了在接受腎切除術(shù)的IV期轉(zhuǎn)移性腎細胞癌(RCC)患者中，通過使用與不使用白細胞介素-2 (IL-2，Chiron, Emoryville, CA, USA)的自體HSPPC-96（Oncophage, Antigenics Inc, New York NY, USA)的時間進展和應(yīng)答率(RR)來確定臨床療效。84例患者被納入研究，然后接受了腎切除術(shù)和腫瘤組織的收集，用于自體疫苗生產(chǎn)。最初的治療計劃大約在術(shù)后4周開始，包括6次注射（疫苗在第1、2、3、4、6、8周注射)。然后在第10周或前后重新調(diào)整，病情穩(wěn)定或反應(yīng)性疾病的患者繼續(xù)接種疫苗，每兩周再接種四次疫苗(在第10、12、14、16周)。在第10周評估時病情進展的患者接受了連續(xù)4個每周5天的11 x 10U IL-2皮下注射療程(第10、11、12、13周)。每隔2周(第10、12、14、16周)使用4劑HSPPC-96。在下一次評估中，完全應(yīng)答的患者再接受兩個周期的HSPPC-96疫苗，或直到疫苗供應(yīng)耗盡。病情穩(wěn)定或部分緩解的患者重復(fù)先前的治療周期。尚未接受IL-2治療的疾病進展者開始接受IL-2治療，而已經(jīng)接受IL-2治療的疾病進展者退出研究。60例可評估患者中，2例完全緩解(CR)，2例部分緩解(PR)。7例病情穩(wěn)定，33例病情進展。16例患者未證實病情穩(wěn)定，2例僅接種疫苗進展的患者在加入IL-2后病情穩(wěn)定。這項研究發(fā)現(xiàn)HSPPC-96疫苗與免疫調(diào)節(jié)劑聯(lián)合使用可提高療效[12]。

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